附表5-3 PCR实验流程图2019 -nCoV

附表5-32019-nCoV
XXXX医院2019-nCoV实验流程图
使用说明:①本记录表须严格遵循试剂准备区→标本制备区→扩增区单一流向移动
②本实验室冰箱温度及环境温湿度为自动监控警报系统,无需人工记录。 ③各项工作执行后,在相应叙述前的“”内打“√”
④本记录表与温湿度记录等归档保存办公区的专用文件柜内;每年装订成册。

实验前准备 试剂/耗材在有效期内 试剂耗材已经质检合格
冲眼器出水检查正常 75%酒精在有效期内,含氯消毒剂现配。 强检设备在检定有效期内(扩增仪、安全柜、离心机、加样器和温湿度监控系统) 紫外灯管在使用有效期内 <1000小时)


试剂准备区(1区) 实验前 打开通风设备 更换I区工作服/口罩/帽子/手套/鞋套 PCR项目/试剂品牌:2019-nCoV/上海伯杰 批号/效期:________________ 本次实际用量:_______人份;SOPPCR-XMSOP-02 乙肝病毒核酸定量检测操作程序()程序执行具体试剂配置。 仪器设备的使用:
离心机: 正常 不正常 振荡器: 正常 不正常 超净工作台: 正常 不正常 试剂配制:
试剂室温平衡30分钟 样本数_______ 阴性对照_______ 阳性对照_______ 质控_______ 配制体系:
核酸扩增反应液_______ul 酶混合液_______ul ORF1ab/N反应液_______ul 震荡混匀瞬时离心按每孔20ul反应体系分配至八连管,密封袋密封至传递窗。 实验后 按实验室清洁程序(SOP-PCR-CX-05)清洁实验室台面、地面、超净工作台、加样器和离心机,并进行紫外线照射30分钟以上; 按实验室废弃物处理程序(SOP-PCR-CX-08)处理实验废弃物。
扩增区(III区) 实验前:口 打开通风设备 更换III区工作服/口罩/帽子/手套/鞋套 扩增仪操作
开机自检及运行正常; 按扩增仪操作SOPPCR-YQSOP-11 ABI 7500 标准操作程序)进行编程、参数、设定; 1:样本编号格式:日期(年//日)+2019-nCoV +样本序号(举例:201901012019-nCoV 0001表示201911日进行2019-nCoV检测的序号为0001的样本。因表格大小限制,表格中统一填写样本序号,序号以三位数表示。
说明:S1-低值质控;S2-高值质控;N0-2 -阴性对照 P-阳性对照


日期编号:______2019-nCoV;样本范围:____________ 扩增仪编号: K1 K2 A B C D E F G H 1

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日期编号:______2019-nCoV;样本范围:____________ 扩增仪编号: K1 K2 A B C D E F G H 1

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实验结果记录及报告:(按PCR-CX-18 检验结果报告管理程序SOP进行结果报告)
检测位点CT ORF1ab N基因
质控 S1

S2

阳性对照
P



N0

阴性对照 N1



N2

质控是否在控____________失控处理及分析___________ 结果记录(样本号+位点CT值)
(可疑)阳性样本:__________需复查样本:_____________ 实验后:
填写相关记录表;
按实验室清洁程序(SOP-PCR-CX-05)清洁实验室台面、地面、超净工作台、加样器和离心机,并进行紫外线照射30分钟以上;
按实验室废弃物处理程序(SOP-PCR-CX-08)处理实验废弃物。
操作者/日期:_____________/___________
《附表5-3 PCR实验流程图2019 -nCoV.doc》
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