诊断学实验报告
实验诊断学实验报告 红细胞计数试验 实验目的: 通过红细胞计数实验 1、掌握红细胞计数方原理、方法及注意事项。 2、掌握血细胞计数板的结构 试验器材: 血细胞计数板、显微镜、盖玻片、试管、血红蛋白吸管、 生理盐水 实验原理: 一定量的血液经一定量等渗性稀释液稀释后,充入血细胞计数池中显微镜下 计数一定容积内的细胞,再换算成每升标本的细胞数报告。 操作步骤: 1、取红细胞稀释液2.0ml毫升,放入一小试管内。 2、用血红蛋白吸管吸血至l0ul处。 3、擦去管尖外部余血将血液迅速轻轻吹入盛有红细胞稀释液的试管内,
上清液嗽洗吸管2-3次,立即摇匀。 4、将计数池与盖玻片用软布料擦净,将盖玻片覆盖于计数池上。 5、用吸管吸取混匀的红细胞悬液,充入计数池中。 6、待2—3分钟,让红细胞完全下沉后,将计数板平放在显微镜台上,用低
倍镜观察,如红细胞分布均匀即可换高倍镜进行计数。 红细胞计数的区域: 中心大方格中的5个中方格(正中一个和四角各一个。 计数原则: 数上不数下,数左不数右的计数原则即凡压在中方格边线(双线上的红细胞,只计上侧与左侧线上的细胞,而压在下侧与右侧线上者不计入。 计算: 红细胞数/l=5个中方格内红细胞数×5×10×201×106 或 红细胞数/l=5个中方格内红细胞数÷100×1012 式中×5 5个中方格换算成1个大方格 ×10 1个大方格容积为0.1ul,换算成1.0 ul。 ×201 血液的稀释倍数 ×106 由u1换算成l 数据处理: rbc: ×l0/l 12参考值 男:(4~5.5×10/l 12 女:(3.5~5)×10/l 12 新生儿:(6~7)×10/l 12 答案不唯一,言之有理即可 注意事项: 1、吸管、试管要注意清洁、干燥以防溶血,操作迅速避免血液凝固,如有血 凝块应重新采血。 2充液前,红细胞复液要充分摇匀,红细胞悬液注入计数池内要求分布均匀,
不可有气泡,亦不可有多余液体外溢。 3、中方格内红细胞分布应均匀,健康成人每中方格红细胞数约为80—100个, 各中方格内之红细胞相近,如悬殊过大(超过10个细胞以上的应重混匀再充填。 实验诊断学实验报告 血红蛋白测定 实验目的: 通过血红蛋白测定 1、氰化高铁血红蛋白比色法原理及技术。 2、掌握红血红蛋白测定的原理、方法及注意事项。 试验仪器: 试管、微量吸管、分光光度计 实验原理: 血红蛋白中的亚铁离子(fe2+)被高铁氰化钾氧化成高离子(fe3+),血红
蛋 白转化成高铁血红蛋白,高铁血红蛋白与氰离子(cn-)结合,生成稳定的氰化高铁血红蛋白。用光电比色计在540nm波长比色。从hicn参考液制作的标准曲线上读取血红蛋白克数。 操作步骤: 1、取试剂5毫升加入血液20ul混匀置5分钟 2、用721光电比色仪,540nm波长,试剂为空白调0点比色,读取 光密度,查标准曲线得结果。 计算: