常见野生药用植物的抗氧化性
常见野生药用植物的抗氧化性
活性测定
学院:化学与制药工程学院
葎草的抗氧化性活性测定
一、实验目的
1.熟悉专业文献的检索方法。2.熟练设计天然药物的提取方法。3.掌握体外抗氧化活性实验筛选方法。4.了解药理活性与化学成分之间的关系。二、实验原理
近年的研究结果表明,在生物体内,需氧代谢的氧化还原反应所产生的羟自由基,可以引发不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反应,损伤膜结构及功能并引起各类疾病;超氧自由基能损伤生命大分子而导致各种疾病。关于天然产物抗氧化活性的研究十分引人注目,从天然材料提取、精制而得到的产品———天然产物对人体的多种疾病往往具有很好的治疗、预防等药理作用和保健功能。据报道,自然界中的植物中存在具有多种生物活性的天然产物,其中一些天然产物在抗氧化性、清除自由基作用方面有突出的表现,这对于抗癌、防癌、抗衰老、预防心血管疾病,提高人民身体健康会产生积极的作用。因此,研究自由基的检测方法并探讨物质对自由基的清除作用具有重要意义。DPPH·(二苯代苦味酰自由基分析法被广泛用于清除自由基物质性质的研究,DPPH·在有机溶剂中是一种稳定的自由基,其孤对电子在517nm附近有强吸收(显深紫色。当有机清除剂存在时,孤对电子被配对,吸收消失或减弱,通过测定吸收减弱的程度,可评价自由基清除剂的活性。DPPH·法是用以评价天然抗氧化剂抗氧化活性的一种快速(反应时间仅需20min、简便、灵敏可行的方法。三、实验仪器与试剂
电子天平,量筒,普通漏斗,抽滤装置,紫外分光光度计,研钵,试管,剪刀四、实验步骤1.药材的采集
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采集样品,样品采集后,洗净晾干。用剪刀剪碎,再用研钵将药材磨细,然后用筛子将大块的筛除。2.药材的提取
准确称取干燥的葎草粉末样品0.4g,加入2050%乙醇溶液混匀,提取2h后过滤取滤液,滤渣再用20ml50%的乙醇水溶液浸提,滤液合并,合并提取液,定容于50ml容量瓶中,密闭冷藏保存,备用。3.体外抗氧化活性检测
向0.004%DPPH的乙醇溶液中加入样品,混合均匀,30min后用分光光度计在517nm处测定吸光值。利用DPPH·溶液的特征紫红色团的吸收,用紫外-可见分光光度法测定加抗氧剂提取液后在波长517nm处吸收的下降表示其对有机自由基消除能力,按下表加反应液。
A0AiAj
用力摇匀,将Ai所表示的样品在室温下静置30min后,加入比色皿中进行吸光度的测定,测出A0、Ai、Aj所表示样品的吸光度值,清除率按公式(1计算。五.实验结果1.原始数据记录A0AiAj
>>>>>0.6440.4310.065
2mlDPPH溶液+2ml50%