正在进行安全检测...

HPLC法测定大活络丸中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2OβD-葡萄糖苷的含量摘要】目的:建立大活络丸中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2OβD-葡萄糖苷的HPLC含量测定方法。方法:采用HPLC法,色谱柱:SymmetryShieldTMRP18(5μm3.9×150mm,柱温30,流动相:乙腈-水(16:84,检测波长:320nm,流:1.0mL?min-1。结果:2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2OβD-葡萄糖苷在0.040.20μg范围内呈现良好的线性关系(r=0.9998),加样回收率96.84%,RSD1.36%。结论:该方法快速、简便、准确、重现性较好,结果可靠,可用于控制大活络丸制剂的质量。【关键词】大活络丸2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2OβD-葡萄糖高效液相色谱法含量测定【中图分类号】R446.5【文献标识码】A【文章编号】1672-5085201407-0071-02大活络丸是有蕲蛇,麝香,黄连,黄芩等48味药材组成的中药复方制剂,具有祛风散寒,除湿化痰,活络止痛之功效,主要用于风痰瘀阻所致的中风,症见半身不遂、肢体麻木、足痿无力;或寒湿瘀阻之痹病、筋脉拘急、腰腿疼痛等症状。何首乌[1]具有解毒,消痈,润肠通便之功效,用于瘰疠疮痈,风疹瘙痒,肠燥便秘;高血脂症状。本文采用HPLC法建立对方中何首乌的指标成分2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2OβD-葡萄糖苷进行含量测定,以便进一步控制大活络丸制剂的质量。1.仪器与试药1.1仪器高效液相色谱仪Waters2695系统,Waters2996检测器,Mellennium32色谱工作站(美国Waters公司KQ250型超声波清洗器,MettlerToledoAG135万分之一电子分析天平。1.2试药对照品:2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2OβD-葡萄糖苷(中国药品生物制品检定所,批号:0844200003,供含量测定用;乙腈(色谱纯),水为纯净水,其他试剂均为分析纯,大活络丸(长春经开药业有限公司,批号:0711080711090711102.方法与结果2.1色谱条件色谱柱:SymmetryShieldTMRP18(5μm3.9×150mm,流动相:乙腈-水(16:84检测波长:320nm,流速:1.0mL?min-1,柱温30.2.2溶液制备2.2.1对照品溶液的制备精密称取2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2OβD-葡萄糖苷对照品适量,加甲醇制成每1ml0.02mg的溶液,作为对照品溶液。2.2.2供试品溶液的制备取本品剪碎,加硅藻土按6:4混合成中粉,取约3.5g,精密称定,置100ml的具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50ml,称重,超声(功率250KW,频率40KHz处理30分钟,用甲醇补足损失的重量,滤过,取续滤液,即得。2.2.3专属性试验按处方比例称取除何首乌的其他药味,依照大活络丸的生产工艺制成缺何首
乌的大活络丸阴性制剂,再按供试品溶液的制备方法制成缺何首乌的阴性对照溶液。分别吸取2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2OβD-葡萄糖苷对照品溶液、大活络丸供试品溶液及缺何首乌的阴性对照溶液10μL,注入色谱仪,按前法分别测定,得到相应的色谱图(图1ABC)。结果表明,2,3,5,4/-四羟基二苯乙烯-2OβD-葡萄糖苷对照品与大活络丸中2,3,5,4/-四羟基二苯乙烯-2OβD-葡萄糖苷的保留时间基本一致,阴性供试品溶液在该色谱峰位置处无相应的峰出现,说明阴性无干扰。1C:大活络丸(缺何首乌)阴性液2.3线性关系考察对照品的制备:精密称取在五氧化二磷干燥器中干燥至恒重的2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2OβD-葡萄糖苷对照品1.97mg,置10ml量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,作为储备液。分别精密吸取储备0.20mL0.40mL0.60mL0.80mL1.00mL10mL量瓶中,加甲醇稀释并定容至刻度,摇,滤过,即得。再分别精密自动吸取上述对照品溶液各10μL,注入液相色谱仪,测定。以峰面积(Y为纵坐标,进样量(X为横坐标做回归计算,得一直线。回归方程为:y=72808×X-103265R2=0.9998以上结果表明,供试品进样量在0.040.20μg范围内,2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2OβD-葡萄糖苷面积与进样量呈现良好的线性关系。2.4精密度试验分别精密吸取11.82μg?mL-12,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2OβD-葡萄糖苷对照品溶液10μL,重复进样5次,结果2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2OβD-葡萄糖苷峰面积的RSD1.44%,精密度较好。2.5稳定性试验取同一供试品溶液(批号:071108,按供试品溶液制备项下方法操作,按0246812小时时间间隔,分别测定峰面积,试验结果表明,RSD1.10%,供试品溶液制备后12小时内测定,色谱峰面积无明显变化,在此时间内供试品化学性质稳定。2.6重复性试验6份供试品(批号:071108,按供试品溶液的制备下方法制备,2.1项下上述色谱条件下进行测定。结果样品中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2OβD葡萄糖苷的平均含量为0.097%RSD0.84%,重复性较好。2.7加样回收率试验取本品已知准确含量的供试品(批号:071108含量0.0971.75g,精密称定塞锥形瓶中,精密加入2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2OβD-葡萄糖苷对照品(1.792mg,按供试品项下方法测定,测定结果见表11加样回收率试验结果试验结果表明,2,3,5,4/-四羟基二苯乙烯-2OβD-葡萄糖苷加样回收率在95%105%范围内,加样回收良好。2.8样品含量测定精密称取3批不同批号大活络丸制剂,按供试品溶液的制备项下方法制备供试液,并在上述色谱条件下测定,计算样品中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2OβD-葡萄糖苷的含量,结果见表22样品含量测定结果(n=3
《正在进行安全检测....doc》
将本文的Word文档下载,方便收藏和打印
推荐:
下载文档
热门推荐
相关推荐