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龙源期刊网http://www.qikan.com.cn三氯化锑分光光度法测定动物肝脏中维生素A含量作者:祝海珍来源:《现代食品·上》2017年第10期摘要:目的:建立动物肝脏中维生素A含量的测定方法。方法:维生素A在三氯甲烷中与三氯化锑相互作用产生蓝色物质,其颜色深浅与溶液中所含维生素A的含量成正比,本研究于波长650nm处测定在选定条件下测蓝色物质的吸光度,从而间接测定维生素A的含量。结果:维生素A在5~100μg/mL范围内与吸光度呈线性关系,相关系数R2=0.9991,检出限为0.1μg/mL,相对标准偏差为2.14%~7.04%(n=6),并选择鸡肝、鸭肝和猪肝做样品加标回收率试验,回收率都在90%以上。同时,将该方法与高效液相色谱法做比较,两者测定动物肝脏中维生素A含量的方法指标基本一致,均符合食品检测标准的要求。结论:本方法操作简便,分析速度快,结果可靠,重现性好,可用于动物肝脏中维生素A含量的测定。关键词:分光光度法;动物肝脏;维生素AAbstract:Objective:ToestablishamethodforthedeterminationofvitaminAinanimalliver.Methods:VitaminAinteractswiththreeantimonychlorideinchloroformtoproducebluematerial,itscolordepthisproportionaltotheamountofvitaminAcontainedinthesolution.Theabsorptionofbluesubstancewasmeasuredin650nm,andindirectlydeterminethecontentofvitaminA.Results:TherewasafinelinearrelationshipbetweenthevitaminAintherangeof5~100μg/mLandabsorbance,thecorrelationcoefficientR=0.9991,thedetectionlimitwas0.1μg/mL,therelativestandarddeviationrangedfrom2.14%to7.04%(n=6).Whileexperimentofsamplerecoveryweredonewithchickenliver,duckliverandliver,therecoveryratewasmorethan90%.Atthesametime,thismethodwascomparedwithHPLC.ThedeterminationmethodsofvitaminAcontentinanimalliverwerebasicallythesame.Theywereinlinewiththerequirementsoffoodtestingstandards.Conclusion:Themethodissimple,quick,reliableandreproducible,whichcanbeusedforthedeterminationofvitaminAinanimalliver.Keywords:Spectrophotometry;Animalliver;VitaminA中图分类号:O657.31维生素A(VitaminA,VA),亦名视黄醇,是人体生长发育及维持机体生命活动不可缺少的脂溶性维生素。维生素A不但可以维持正常的视觉功能,防止出现夜盲症,而且还具有维持上皮细胞结构的完整与健康、促进机体正常生长发育、增强机体的造血功能和预防癌症等十分重要的功能[1-2]。近年来发现维生素A对脑发育和学习记忆有不同程度的影响[3-5]。
龙源期刊网http://www.qikan.com.cn动物肝脏被誉为食品中的“维生素A之王”。近年来,动物肝脏中维生素A的检测方法主要有高效液相色谱法(HPLC)[6-9]和高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS)[10]。高效液相色谱法和高效液相色谱-质谱法分离度高、重现性好、灵敏度高、准确性好,但其仪器比较昂贵,普通理化实验室不具备购置条件,并且仪器操作时间比较长,一般需要0.5~1.0h。本文旨在采用分光光度法建立一种快速检测动物肝脏中维生素A的方法,该方法仪器操作简单、分析成本低、速度快、结果可靠且重现性好。1仪器和试剂1.1试验仪器UV-4802H型紫外可见分光光度计,尤尼柯(上海)仪器有限公司;U3000高效液相色谱仪,赛默飞公司;AL204分析天平(感量0.001g),梅特勒-托利多公司;超声装置,昆山市超声仪器公司;RE-2000A旋转蒸发仪,上海亚荣有限公司。1.2试验试剂维生素A乙酸酯、甲醇,色谱纯,阿拉丁试剂公司;乙醚、无水乙醇、正己烷、无水硫酸钠,分析纯,国药集团化学试剂有限公司;三氯化锑、三氯甲烷,分析纯,阿拉丁试剂公司;试验用水为纯净水,娃哈哈集团。三氯化锑-三氯甲烷溶液:准确称取5g三氯化锑至100mL棕色容量瓶中,用三氯甲烷配定容,配制成50g/L三氯化锑溶液。维生素A标准溶液:准确称取维生素A乙酸酯50.0mg于250mL皂化瓶中,加30mL无水乙醇、20mL30%KOH甲醇溶液,于100℃回流皂化30min,冷却后用乙醚反复提取3次,并用甲醇定容至50mL容量瓶中,得浓度为1.0mg/mL的贮备液。2