维生素AD胶丸中维生素A的含量测定
维生素AD胶丸中维生素A的效价测定
维生素A的结构为具有一个共轭多烯醇侧链的环己烷,由于其中有多个不饱和键,性质不稳定,易被空气中氧或氧化剂氧化,易被紫外光裂解,并且其对酸不稳定。其醋酸酯比维生素A稳定,临床使用一般将本品或棕榈酸酯溶于植物油中应用。因此,维生素A及其制剂除需密封在凉暗处保存外,还需充氮或加入合适的抗氧剂。维生素A与氯仿、乙醚、环己烷或石油醚能任意混合,在乙醇中微溶,在水中不溶
一、实验目的
掌握UV三点校正法的原理和维生素A效价测定的方法。
二、主要仪器和试剂
紫外可见分光光度仪(具扫描功能),分析天平,石英比色皿,25mL容量瓶若干,移液管,注射器,刀片,烧杯若干个,维生素A胶丸(规格2.5万单位/粒),环己烷,乙醚
三、实验原理
本法是在三个波长处测得吸收度,根据校正公式计算吸收度A校正值后,再计算含量,故本法称为“三点校正法”。该原理主要基于:
(1)杂质的无关吸收在310nm~340nm的波长范围内几乎呈一条直线,且随波长的增长吸收度下降。
(2)物质对光吸收呈加和性的原理。即在某一样品的吸收曲线上,各波长处的吸收度是维生素A与杂质吸收度的代数和,因而吸收曲线也是二者的叠加。
四、实验过程
1胶丸内容物平均重量的测定
取胶丸20粒,精密称定,(2.4641g),用注射器将内容物抽出,再用刀片切开丸壳,用乙醚逐个洗涤丸壳三次,置50mL烧杯中,再用乙醚浸洗1~2次,置通风处,使乙醚挥散,精密称定,得总壳重(0.7213g),算出每丸内容物的平均重量。2供试品溶液的制备与测定第一法
方法:精密称取一粒维生素AD胶丸内容物(0.0048g),用环己烷溶解并定量稀释成25mL。取0.8mL再用环己烷稀释至25mL,即制成每mL中含9~15单位的溶液。按照分光光度法,分别在300nm,316nm,328nm,340nm,360nm五个波长下测定吸收度。计算各吸收度与波长328nm处吸收度的比值和波长328nm处的百分吸光系数(E1%1cm)值。计算:
⑴求E1%1cm:由A=E1%1cm×C×L,求得E1%1cm=A/(C×L)。⑵求效价(IU/g):效价系指每克供试品中所含维生素A的国际单位数(IU/g)。即IU/g=E1%1cm×1900。
注:1900为维生素A醋酸酯在环己烷溶液中测定时的效价换算因素。由来:维生素A的含量用生物效价即国际单位(IU/g)来表示。维生素A的国际单位规定如下: