HPLC法测定刺五加注射液中总异嗪皮啶的含量
2007年7月第4，卷第。期—药物与临床HPLC法测定刺五加注射液中总异嗦皮咤的含量刘丽’赵玉江2柳森国’(1.黑龙江中医药大学附属第一医院，哈尔滨150040;2.哈药集团三精制药有限公司，哈尔滨150069〔摘要」目的建立一种高效刺五加注射液中总异嗓皮吮的HPLC测定方法。方法利用强酸水解法制备分析样品，基于分析目标优化色谱条件，最后利用已建立HPLC测定5批刺五加注射液。结果该分析方法的精密度、稳定性、加样回收率等均良好皿SD<5%，且快速灵敏，含量测定结果均一、可信。结论此HPLC法可用于刺五加注射液的质量控制分析。【关键词〕刺五加注射液;HPLC;总异嗦皮吮;含量测定[中图分类号]R284.1;R286.0[文献标识码]A[文章编号]1673-9701(200709-73-02刺五加注射液由刺五加经现代水针工艺制备而成，具有平补肝肾，益精壮骨的作用，用于肝肾不足所致的短暂性脑缺血发作、脑动脉硬化、脑血栓形成、脑栓塞等。刺五加所含成分复杂，2.4.1标准曲线的制备精密称取异嗓皮Pit对照品加甲醇制成0.60mg/-L的溶液，取定量溶液分别制备成含异嚓皮吮0.05N.g/mL,0.25Rg/mL,OSORg/mL,0.75WmL,1.OWmL,1.25Rg/mL。按上述色谱条件分别进样测定。以峰面积积分值为横坐标，对照品进样量其中异嗦皮吮(isofraxidin具有明显的镇静作用to，可作为靶标性成分，用于刺五加注射剂的质量控制分析。本文拟建立一种快速灵敏的HPLC法，用于刺五加注射液中总异嗓皮咤的测定。伽9/m助为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程:y=4E-06x-0.0075(r-09997，线性范围为0.05-1.25ELg/mLo2.4.2精密度试验取同一样品溶液连续进样6次，测得异嗓皮吮的峰面积RSD=1.9%02.4.3稳定性考察同一样品溶液分别在Oh,2h,4h,6h,8h进样，测得异嗦皮吮浓度的RSD=2.7%，表明样品溶液在8h内稳定。2.4.4重现性试验取同一批号样品6份(200608172，按2.4项下方法操作，分别测定异嗦皮咤的含量，RSD=2.1%o2.4.5回收率试验采用加样回收率测定方法，取刺五加注射液1仪器与试药SP200t〕高效液相色谱仪，SP2000紫外检测器漾国光谱物理公司;乙睛为色谱纯(美国天地公司，水为二次重蒸水，其余试剂均为分析纯。异嗦皮吮对照品(中国药品生物制品检定所，刺五加注射液(由黑龙江完达山制药有限公司。2方法与结果2.1色谱条件1mL，加入500.Owg的异嗓皮吮对照品溶液，按2.4项下方法操作，制备成加样回收供试液，并依法测定。结果异嗓皮吮的平均加样回收率为94.5%,RSD=3.9%(n=6o2.5样品测定结果取5批样品依法操作，测定峰面积，计算样品含量，结果(见表1。色谱柱:AlltimaC18(4.6mmx200.Omm,5}Lm;流动相:乙睛-水一磷酸(95:4:1;流速:1mIlmin;检测波长:341nm;柱640`C;进样量:1ORL.2.2供试品溶液的制备[21取刺五加注射液10mL,加甲醇60mL超声45min，放冷，抽滤，滤液回收至干，残渣加2.5mol/LH2S氏30mL，于沸水浴中回流2.5h，加氯仿25mL回流45min，再用氯仿萃取3次，每次4mL，水洗两次，每次45mL,氯仿液回收至干，加甲醇约