正在进行安全检测...

比色法1.原理维生素A在三氯甲烷中与三氯化锑相互作用,产生蓝色物质,其深浅与溶液中所含维生素(维生素食品)A的含量成正比。该蓝色物质虽不稳定,但在一定时间内可用分光光度计于620nm波长处测定其吸光度。2.仪器实验室常用设备分光光度计回流冷凝装置3.试剂本实验所用试剂皆为分析纯,所用水皆为蒸馏水1无水硫酸钠Na2SO42乙酸酐3乙醚不含有过氧化物4无水乙醇不含有醛类物质5三氯甲烷应不含分解物,否则会破坏维生素A
检查方法:三氯甲烷不稳定,放置后易受空气中氧的作用生成氯化氢和光气。检查时可取少量三氯甲烷置试管中加水振摇,使氯化氢溶到水层。加入几滴硝酸银溶液,如有白色沉淀即说明三氯甲烷中有分解产物。625%三氯化锑-三氯甲烷溶液用三氯甲烷配制25%三氯化锑溶液,储于棕色瓶中(注意避免吸收水分)750%氢氧化钾溶液(KOHW/V8维生素A标准液视黄醇(纯度85%Sigma用脱醛乙醇溶解维生素A标准品,使其浓度大约为1ml相当于1mg视黄醇。临用前用紫外分光光度法标定其准确浓度。9酚酞指示剂95%乙醇配制1%溶液4.操作步骤维生素A极易被光破坏,实验操作应在微弱光线下进行。4.1样品处理:根据样品性质,可采用皂化法或研磨法。1)皂化法:皂化:根据样品中维生素A含量的不同,称取0.5g5g样品于三角瓶中,加入2040ml无水乙醇及10ml1:1氢氧化钾,于电热板上回流30min至皂化完全为止。(皂化法适用于维生素A含量不高的样品,可减少脂溶性物质的干扰,但全部实验过程费时,且易导致维生素A损失)
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